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| 什么是限制性内切酶 |
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| 点击次数:1394 更新时间:2011-04-25 |
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在生物体内有一类酶,它们能将外来的DNA切断,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以?;は赴械囊糯畔ⅰS捎谡庵智懈钭饔檬窃贒NA分子内部进行的,故名限制性内切酶(简称限制酶)。限制酶是基因工程中所用的重要切割工具??蒲Ъ乙汛釉松镏蟹掷氤隽诵矶嘀窒拗泼福⑶乙丫唐坊?,在基因工程中广泛使用。根据限制酶切割的特点,可将它们分为两大类:一类是切割部位无特异性的;另一类是可特异性地识别核苷酸序列,即只能在一定的DNA序列上进行切割。这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列,也就是在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序*一致,如图3?8所示DNA的碱基顺序。在基因工程中使用的多数是后一类酶。限制酶在特定切割部位进行切割时,按照切割的方式,又可以分为错位切和平切两种。错位切一般是在两条链的不同部位切割,中间相隔几个核苷酸,切下后的两端形成一种回文式的单链末端,这个末端能与具有互补碱基的目的基因的DNA片段连结,故称为黏性末端。这种酶在基因工程中应用zui多。另一种是在两条链的特定序列的相同部位切割,形成一个无黏性末端的平口。 |
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